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化妝品安全性評價試驗方法:動物骨髓嗜多染細胞微核試驗

2022-07-07 13:13:26
化妝品安全性評價試驗方法:動物骨髓嗜多染細胞微核試驗

  化妝品安全性評價試驗中的鼠傷寒沙門氏菌回復突變試驗(Ames)試驗、哺乳動物骨髓細胞染色體畸變檢測試驗、動物骨髓嗜多染細胞微核試驗和小鼠精子畸形檢測試驗介紹。
 

動物骨髓嗜多染細胞微核試驗

  研究化學物誘發(fā)哺乳動物染色體畸變的方法很多,微核試驗以其簡便、快速、具

  有一定的敏感性,被廣泛用于遺傳毒理學研究中。
 

目的

  該試驗是一種用體內(nèi)試驗來檢查骨髓細胞染色體畸變的方法,特別適用于檢出紡錘體的部分損害而出現(xiàn)的染色體丟失或染色單體的無著絲點片段
 

實驗動物和劑量分組

  小白鼠是微核試驗的常規(guī)動物,也可選用大白鼠,一般常用體重為25~30g的小鼠或體重為150~200g的大鼠,雌雄皆可,每個劑量組至少5只動物,另外設溶劑對照組和陽性物組。常用環(huán)磷酰胺做為陽性對照物。
 

  根據(jù)受試物理化性質(zhì)(尤其是水溶性脂溶性),確定受試物所用的溶劑,常用水、植物油(玉米油等)或吐溫-80等溶濟。劑量的選擇是很重要的,用藥量太低,會漏掉陽性物,用藥量太大,可致動物死亡,或因?qū)撬瓒拘宰饔锰珡?,致使嗜多染紅細胞受到抑制,難以獲得正確的結果。一般取受試物 LD50的1/2、 1/5、1/10、 1/20等劑量,以求獲得微核的劑量一反應關系曲線。
 

給藥途徑和方式

  給藥途徑視試驗目的而定,常用經(jīng)口灌胃方式,建議采用30小時給藥法,即兩次給藥間隔24小時,第二次給藥后6小時取材。
 

試驗方法

  骨髓液的制取

  動物脫頸處死,打開胸腔,沿著胸骨與肋骨交界處剪斷,剝掉附著胸骨上的肌肉,擦凈血污,橫向切斷胸骨,暴露止髓腔,然后用小骨血鉗擠出胸骨骨髓液。

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